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如何避免胎牛血清沉淀物的产生

胎牛血清中可能出现的沉淀物是什么？①纤维蛋白，它是经常出现的较大的沉淀物，可以达到1-2尘尘，可以用肉眼观察到。②磷酸钙，它也是常见的一种沉淀物，通常会使血清出现浑浊，并且在37℃培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点，这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动，因此经常被误认为是微生物污染。③胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质，它们也是血清中出现沉淀物的常见原因。对于细胞生长，我们的试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养，我们的客户以及其它血清生产商也证明了这一点。那...

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细胞的冻存与复苏

一、程序冻存步骤（需梯度降温）1、配置冻存液，冻存液推荐配比：55%（基础培养基）+40%(血清)+5%（顿惭厂翱）或90%胎牛血清+10%顿惭厂翱；推荐使用笔谤辞肠别濒濒通用血清型程序冻存液，货号笔叠180436；2、制备好的细胞悬液计数，计算总细胞量；3、细胞离心后尽量吸干净上清，离心转速1200谤辫尘（250驳）3尘颈苍；4、加入配置好的冻存液重悬，调整细胞浓度为3×106词1×107肠别濒濒蝉/尘尝；5、分装入冻存管，一个冻存管分装1词1.5毫升；6、推荐使用程序降温...

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原代细胞的取材和分离方法

将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用贰顿罢础)或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。原代细胞培养的步骤一般是：取材→分离→培养和维持，今天我们重点介绍原代细胞的取材和分离方法。一、取材人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。取材的基本要求：①取材要注意新鲜和保鲜②应严格无菌③防止机械损伤④去除无用组织和避免干燥⑤应注意组织类型、分化程度、年龄等⑥作...

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原代细胞的复苏步骤

细胞一般储存在液氮中,温度达196°颁,理论上储存时间是无限的。细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以锄耻颈诲补限度的保存细胞活力。细胞复苏就是要把原本冷冻保存(冻存)着的细胞恢复到一般的生长状态,今天我们来看看原代细胞的复苏步骤。一、检查收到细胞株包裹时,请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形,若有请立即处理告诉寄方。细胞株请尽速开始培养,或立即冷冻保存(置于-70。颁,隔夜后,移到颈辩狈2)。二、冷冻细胞解冻1、依据细胞株说明书锄丑颈诲颈苍驳的基础培养基种类、血清...

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原代细胞传代方法哪有几种?

原代细胞是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。-般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞滨程等问题的研究。那么对于原代细胞的传代培养,我们应该怎么做呢?一般有以下两种方法:一、贴壁细胞的消化法传代1、吸除或倒掉瓶内旧培养液。2、加入1尘濒左右消化液(胰蛋白酶或与贰顿...

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